Каранавірус сіндрому вострай дыярэі свіней (SADS-CoV) - гэта нядаўна выяўлены кішачна-патагенны каранавірус свіней, які можа выклікаць вадзяністую дыярэю ў нованароджаных парасятаў і нанесці значныя эканамічныя страты свінагадоўлі.У цяперашні час не існуе падыходнага сералагічнага метаду для ацэнкі эфектыўнасці інфекцыі SADS-CoV і вакцыны, таму існуе вострая неабходнасць выкарыстання эфектыўнага імунаферментнага аналізу (ІФА), каб папоўніць гэты недахоп.Тут рэкамбінантная плазміда, якая экспрэсіруе спайк-бялок SADS-CoV (S), зліты з Fc-даменам IgG чалавека, была сканструявана для атрымання рэкамбінантнага бакулавіруса і экспрэсіі ў клетках HEK 293F.Бялок S-Fc ачышчаны смалой пратэіна G і захоўвае рэакцыйную здольнасць з антыцеламі супраць Fc чалавека і анты-SADS-CoV.Затым бялок S-Fc быў выкарыстаны для распрацоўкі непрамога ІФА (S-iELISA) і аптымізацыі ўмоў рэакцыі S-iELISA.У выніку аналізу значэння OD450 нм 40 сыроватак з адмоўным вынікам SADS-CoV, пацверджанага імунафлюарэсцэнтным аналізам (IFA) і Вестэрн-блотінгам, было вызначана, што гранічнае значэнне складае 0,3711.Каэфіцыент варыяцыі (CV) 6 станоўчых сыроватак на SADS-CoV у межах і паміж прагонамі S-iELISA быў менш за 10%.Тэст на перакрыжаваную рэактыўнасць паказаў, што S-iELISA не мае перакрыжаванай рэактыўнасці з іншымі сыроваткамі вірусаў свіней.Акрамя таго, на падставе выяўлення 111 клінічных узораў сыроваткі агульны ўзровень супадзення ІФА і S-iELISA склаў 97,3%.Тэст нейтралізацыі віруса з 7 рознымі значэннямі OD450nm сыроваткі паказаў, што значэнне OD450nm, выяўленае S-iELISA, станоўча карэлюе з тэстам нейтралізацыі віруса.Нарэшце, S-iELISA быў праведзены на 300 узорах сыроваткі свінафермы.Камерцыйныя наборы іншых энтэравірусаў свіней паказалі, што станоўчыя паказчыкі IgG для SADS-CoV, TGEV, PDCoV і PEDV складаюць 81,7%, 54% і 65,3% адпаведна., 6% адпаведна.Вынікі паказваюць, што S-iELISA з'яўляецца спецыфічным, адчувальным і ўзнаўляльным метадам і можа выкарыстоўвацца для выяўлення інфекцыі SADS-CoV у свінагадоўлі.Гэты артыкул абаронены аўтарскім правам.Усе правы ахоўваюцца.
Час публікацыі: 22 чэрвеня 2021 г